三、豬細菌性腹瀉的免疫防控
細菌性腹瀉尤其是致病性大腸桿菌誘發的仔豬黃白痢是導致初生和哺乳仔豬死亡的重要殺手,同時該病極易和傳染性胃腸炎病毒、流行性腹瀉病毒、輪狀病毒混感(并發或繼發)。基層的小批量散養農戶,由于飼養條件較差、環境衛生不佳等不良因素,使該病發生的幾率顯著增加。該病的防制水平直接關系到這些飼養戶仔豬生產的成敗,應引起廣大基層養豬戶的高度重視。
1 豬大腸桿菌性腹瀉—仔豬黃白痢
1.1 病原特點
致病性大腸埃希氏菌,革蘭氏染色陰性,有菌毛(K88、K99、987P)并產生腸毒素(ST1、2,LTB)。
1.2 發生特點
幼齡常發,頭胎多發;黃痢(早發性大腸桿菌病)發生于1~7日齡仔豬;白痢(遲發性大腸桿菌病)發生于10~30日齡仔豬。四季均發,在冬夏或春季溫差大時易發。該病占新生仔豬消化道疾病的50%;環境較差、營養不良和氣候驟變等應激因素為發病誘因。發病機理是菌毛吸附定植—產生腸毒素—腹瀉。
1.3 臨床癥狀與病變特點
1.3.1黃痢 最急性型:生后突死,全窩死亡;急性型:突瀉日重,黃色水便,干渴脫水,迅速死亡,耐過成僵豬。
1.3.2白痢 10~20日齡居多;頻繁腹瀉,初黃后白;寒戰疊臥,昏迷虛脫,漸瘦少死(5~6天死亡);多能自然康復。
1.3.3病變 腸膨壁薄,內容物水樣或膠凍樣。
1.4 宏觀流行態勢與發生新特點
發病率和死亡率越來越高、流行范圍越來越廣;畜禽發病日齡越來越大、臨床癥狀越來越重;新的致病血清型持續增多且毒力日漸增強;耐藥菌株越來越多且耐藥性產生的速度越來越快;藥物防治效果越來越差、可選擇的藥物品種越來越少;常規標準株疫苗免疫效果越來越不穩定;并發與繼發感染日漸上升。
1.5 發生的主要原因
濫用藥物(治療與飼料添加)造成強大的藥物選擇壓力;巨大的宿主群體及群體間的交互流動和較低的(不科學的)飼養管理與防病水平為大腸桿菌提供了更多的繁殖和選擇進化機會;苗不對型;飼養外環境中病原密度過大且持續存在。
1.6 防制
1.6.1加強日常消毒和衛生管理,將飼養外環境中的病原密度保持在最低水平。
1.6.2開展病原監測,為飼養外環境的潔凈度提供科學標準。
1.6.3采用免疫為主、藥防為輔的防制方針。
1)常規疫苗可分為多價現地株滅活苗、多價菌毛亞單位苗兩大類;按佐劑類型還可分為油乳劑滅活苗、蜂膠佐劑滅活苗、鋁膠佐劑滅活苗和蜂膠中藥佐劑滅活苗等多種劑型。多價現地株滅活苗,即分離現地株型配合標準株制作多價苗,并隨時把握現地株的動態變異情況及時分離鑒定加入苗中。此類苗應用較為廣泛,而且免疫效果確實,為當前預防該病的重要苗種。上述苗型中以蜂膠和蜂膠中藥佐劑滅活苗效果最佳。多價菌毛亞單位苗,即通過一定的方法提取常見數種血清型菌株的菌毛加佐劑而制成的疫苗。因工藝較復雜應用范圍較小。
2)基因工程疫苗 目前共有3類即K88-99雙價、K88-LTB雙價、ST1-LTB雙價基因工程苗;K88-ST1-LTB三價基因工程疫苗等,現介紹K88-ST1-LTB三價基因工程疫苗。①技術特點:本研究是遼寧省益康生物制品廠與有關單位合作利用基因工程技術將ST1、LTB、K88三段基因分別克隆后融合插入質粒載體轉化工程菌而制成的三價基因工程疫苗。該基因工程疫苗從中和腸毒素和防止細菌黏附(定植)兩方面來預防致病性大腸桿菌的致病作用。我廠對大腸桿菌致病性進行深入研究,經研究表明,大腸桿菌能產生外毒素(ST1、LTB),該毒素可激活腸上皮細胞的腺苷酸(CGMP)的產生,使細胞分泌亢進,發生腹瀉和脫水。我廠基于此種致病機理,選取大腸桿菌基因片段中的ST1、LTB、K88作為抗原,并運用生物學技術去除ST1、LTB的毒性,成功地研制出豬大腸桿菌病ST1-LTB-K88三價基因工程菌苗。該苗是運用當今先進的研究手段及生產工藝經科學配方組合而成。目前已申報國家專利。②特點:安全、高效,無毒副作用,免疫保護期長,使用方便;免疫保護譜寬,國內首創;利用基因工程技術,把表達ST1、LTB、K88的目的基因連接起來,插入載體,成功構建基因工程菌株,技術含量高;仔豬通過吃初乳獲得被動性免疫,所產生的抗體即可中和腸毒素,還可阻止細菌黏附。③用法與用量:預防由大腸埃希氏菌引起的仔豬黃痢和白痢,用于妊娠母豬和初生仔豬。未經本疫苗免疫過的初產母豬,于產前30~40天和15~20天,各注射1次,每次肌肉注射5毫升/頭;經本疫苗免疫過的經產母豬,于產前15~20天肌肉注射5毫升/頭;未經免疫的母豬,其新生仔豬2毫升/頭。④實際應用概況:本基因工程疫苗通過現場實際應用,在遼寧省應用40萬頭份、吉林省20萬頭份、黑龍江省16萬頭份、北京11萬頭份、河南省12萬頭份、河北省13萬頭份、山東省15萬頭份,平均免疫保護率達92.46%。安全可靠,效果確實,對仔豬黃白痢均有良好的預防效果。
3)科學的藥物防制 應開展藥敏試驗,選擇數種敏感藥物交替使用。在藥物使用順序上應堅持先“一線”后“二線”的原則。
致病性大腸桿菌是條件致病性因子,在動物機體健康的條件下,機體的抵抗力尤其是消化道黏膜非特異性的防御能力和微生態系統可抑制該病原的過度增殖而防止腹瀉的發生。但由于各種不利因素(如氣候驟變、寒冷、潮濕、營養不良、轉群、長途運輸等)造成機體消化道微生態系統失調和黏膜非特異防御能力下降時,致病性大腸桿菌就可乘虛而入大量增殖產生腸毒素導致腹瀉,同時該病還可與流行性腹瀉病毒、傳染性胃腸炎病毒和輪狀病毒引發的病毒性腹瀉發生并發或繼發感染,導致多重感染造成仔豬大批發病和死亡。
2魏氏梭菌—仔豬紅痢(豬梭菌性腸炎、仔豬傳染性壞死性腸炎)
2.1 病原特點
C型產氣莢膜梭菌,革蘭氏染色陽性,無鞭毛,不運動,可形成芽胞;廣布自然界,部分母豬的腸道中亦存在;人亦帶菌;豬、綿羊易感;本菌可產生致死性毒素(腸壁繁殖,不入血流)。
2.2 發病特點
主染1~3日齡仔豬,生后10小時即發病;血便、腸壞死;病程短,病死率高。
2.3 臨癥特點
最急性型:生后1小時或1天發病,當天或次日死亡;突發血痢、迅衰瀕死;或無癥突死。急性型:一般3天死亡;腥臭紅褐水便,消瘦衰弱;嘔吐尖叫;我國多見。亞急性型:5~7天死亡;非出血性持續腹瀉、極度消瘦。慢性型:2周至數周;間歇或持續腹瀉;精神食欲尚好,生長受阻。
2.4 病變特點
空腸出血壞死、外觀深紅、界限清晰、血性內容物。
2.5 診斷
2.5.1臨癥病變要點 3日齡血便、病程短、病死率高、空腸清晰壞死。
2.5.2實驗室檢測 細菌直接鏡檢:腸內容物涂片,革蘭氏染色鏡檢。毒素檢驗:腸內容物處理后注射小鼠,如迅速死亡,證明毒素存在。細菌分離鑒定:腸內容物—接種厭氣肉肝湯—葡萄糖血瓊脂厭氧培養—雙層溶血環—遇空氣菌落變綠;進一步培養作毒素試驗和毒素中和試驗。
2.6 防制
主要應用滅活疫苗,如“仔豬紅痢滅活苗(鋁膠或干粉)”或“仔豬紅痢α-β雙價基因工程疫苗”,于分娩前半個月和1個月各注射1次。
3蛇形螺旋體—豬痢疾
3.1 病原特點
豬痢疾蛇形螺旋體;9個血清群;革蘭氏染色陰性,長螺絲狀,以長軸為中心旋轉運動;適應性較強;對熱、干燥敏感;常見消毒藥可迅速將其殺滅。
3.2 發生特點
僅豬發病,鼠、犬、鳥、蠅帶菌;各齡均感,7~10周齡多發;常因引豬暴發;無明顯季節性;病豬和帶毒豬為主要傳染源,康復豬帶菌長達數月;緩慢持續、纏綿不斷。
3.3 臨癥特點
潛伏期長(3~60天,多為7~14天)。最急性:無癥死亡;為本病暴發預兆。急性:便硬覆液、迅速腹瀉、黃軟水樣后含血;漸衰死亡。亞急性與慢性:病情較輕,便液少血,漸瘦滯長,易于復發。
3.4 病變特點
大腸偽膜、皺褶消失;系膜水腫。
3.5 診斷
確診需實驗室檢測,糞便鏡檢;病原分離鑒定;血清學檢驗:凝集試驗、間接熒光抗體、被動溶血試驗、瓊擴和酶聯免疫吸附試驗(ELISA)。
3.6 防制
3.6.1藥物治療 療效快,不復發;藥敏擇藥,交替用藥。
3.6.2免疫 尚無可靠的疫苗;“現地滅活佐劑疫苗(現地優勢血清群)”的研制與應用是目前預防該病的一個主要方向。
4沙門氏菌—豬副傷寒
4.1 病原
沙門氏菌屬的多種菌株;革蘭氏染色陰性;對消毒藥敏感。
4.2 發生特點
人、多種動物均感,健康帶菌,條件發病;各齡均感,幼齡易感,1~4月齡豬多發;病畜和帶菌者為主要傳染源;四季均發,多雨潮濕、環境應激易發。
4.3 臨癥特點
急性(敗血型):斷乳前后仔豬多發,突發死亡;病程短(1~4天),高熱沉郁、腹痛下痢、呼吸困難;耳根、胸前和腹下皮膚出現紫紅色斑。亞急性和慢性(結腸炎型):臨床多見;高熱萎靡、寒戰堆疊;膿性眼眵、角膜混濁、先便秘后下痢、黃綠惡臭;病程數周;終死或成僵豬。
4.4 病變特點
急性:脾藍、腫大,切面藍紫;腸系膜淋巴結索狀腫大,切面大理石樣;肝壞死。亞急性和慢性:壞死性腸炎—盲、結腸腸壁增厚,覆蓋腐乳狀物,其下紅色潰瘍。
4.5 診斷
細菌分離鑒定和血清學檢驗。
4.6 防制
4.6.1免疫 滅活疫苗:免疫效果不確實,故不常用。弱毒(凍干)活疫苗:疫苗菌種為我國選育的C500,毒力弱、免疫原性好。免疫程序:常發區斷乳前后各免疫1次,間隔3~4周。使用注意事項:瓶簽注明口服者不能注射;口服應該用新鮮常溫飼料,嚴禁用熱料和含有抗生素、酒糟等影響菌苗活力的飼料,疫苗必須用冷開水稀釋,用量為20毫升/頭;本疫苗適用于30日齡以上健康仔豬。
4.6.2藥物治療 藥敏試驗擇藥,交替應用。
5腹瀉的輔助治療
藥敏擇藥:以藥敏試驗選擇數種敏感藥物;也可采取試驗治療性擇藥法,即先少購數種治療腹瀉的新藥,然后通過對患病仔豬進行標記試驗性治療,再依據療效選擇幾種敏感藥物大量購進投入正式治療,注意交替應用。