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改進飽和鹽水漂浮法診斷兔球蟲病

   日期:2016-03-22     來源:聚農網    作者:jn720.com    瀏覽:127    
  球蟲病是家兔常見的寄生性原蟲病,主要由艾美爾屬球蟲所引起的,各種年齡的家兔都有易感性,4~5月齡幼兔感染率可達100%,球蟲病導致幼兔生長發育受阻,甚至大批死亡,本病常呈地方性流行。由于球蟲的種類和寄生部位的不同,可以分為肝球蟲病和腸球蟲病;但混合感染最為常見。據我國學者報道,全國已發現16種兔艾美爾球蟲。從1997~2005年中,我們在臨床上數百次改進飽和鹽水浮集法,盡量縮短診斷時間、提高檢出率,在256例球蟲病檢測中,診斷準確率達90%以上,為養兔業提供了很好的技術方法。 

    1 材料和方法 

    1.1 制備飽和食鹽溶液 

    將蒸餾水邊加熱邊加入NaCI,直至不再溶解生成沉淀為止(1000mL水中約加入NaCl370g)。用濾紙(型號為中速202)過濾,冷卻(NaCI略有析出)后使用。 

    1.2 取糞便 

    將剖檢的病兔尸體平放,提出胃、腸部分平放在方盤內,取十二直腸或盲腸內的糞便(糞便內最好略帶血且不要過稀)5g放入容量為50~60mL的寬口瓶或量筒中備用。 

    1.3 卵囊富集方法 

    1.3.1 在盛有糞便的寬口瓶或量筒中加入少量的飽和食鹽溶液(一般為容器容量的1/2為宜),用玻璃棒壓碎且攪拌混勻,攪拌時注意不要濺出。攪拌好后將寬口瓶或量筒靜置40min左右。 

    1.3.2 用四層紗布將靜置好的液體過濾入另一寬口瓶或量筒中,棄去糞渣,繼續注入飽和食鹽溶液至瓶口,要使瓶口液面凸起,但又不會溢出,靜置1.5小時左右。 

    1.3.3 用層紗布將靜置好的液體過濾圖另一寬瓶口上,使載玻片底面與瓶內的液面相接觸,勿使有空隙;然后將載玻片輕而快地自瓶口向上提起,同時迅速翻轉,使液面向上,勿使液體流落:取一蓋玻片,均勻地壓在載玻片上,使蓋玻片與液體充分接觸,不要出現氣泡。 

    2 鏡檢 

    將載玻片置于10x10倍的光鏡下,調整顯微鏡,使視野清晰,并且光亮不必太強。調好視野后,可隨意滑動載玻片的位置,仔細觀察是否有球蟲卵囊。顯微鏡下觀察球蟲卵囊呈橄欖形,有棗核般大小,卵囊壁有的厚有的薄,一般光滑而均勻一致。由于球蟲種類不同,所以卵囊的形態(包括長卵圓形、長圓形、卵圓形、梨形、長橢圓形、寬卵圓形、筒形)和顏色(淡黃、無色、橙黃、淡綠、淡灰)略有差異。 

    3 討論和小結 

    3.1 本診斷方法與普通的飽和鹽水漂浮法原理一致,都是采用比卵囊密度大的溶液浸泡糞便,使卵囊上浮于液體表層。但是本診斷方法更為簡單。對于實驗條件、實驗設備以及實驗操作的要求也不高,并且只要實驗操作無誤,發現卵囊的機會很高。非常適合基層獸醫人員診斷兔球蟲病。 

    3.2 在配制飽和食鹽溶液時,要注意食鹽量不要加的過多,只要按照比例加入,不再析出即可。如果鹽量過多,在第二次靜置時就會析出大量食鹽結晶,影響觸片效果。 

    3.3 在用載玻片接觸液面時,用力不要過大,并且要一次成功,因為靜置后所有的球蟲卵囊都會漂浮在液面上,經過一次接觸,球蟲卵囊大部分已經粘附在載玻片上,液面已所剩無幾。 

    3.4 在向載玻片上壓蓋玻片時,用力要輕,要從載玻片的一側傾斜著壓向另一側,此時動作要迅速,一定要使蓋玻片和載玻片間沒有氣泡。如果出現氣泡,若觀察不仔細有時會誤將氣泡視作球蟲卵囊,影響鏡檢結果。 

    3.5 在使用光鏡觀察時,光亮的強度一定要小,要使鏡下形成一個暗視野。因為球蟲卵囊并不是一個實心的橢圓體,而是空泡狀顏色略暗的橢圓體,若光亮太強,有時反而觀察不到球蟲卵囊。 
 
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