使用組織分離復壯平菇菌種，簡便易行、效果明顯，很適宜一般種植戶。其操作技術要點是：⑴在菇床、菌墻中選擇出菇早、無雜菌侵染、株型緊湊、圓整肉厚、色澤美觀、七八成熟的第一潮菇的肥壯菇體作種菇；⑵在種菇中部取最大的3-4張菇片，用70%的酒精輕擦表面后置于接種箱內消毒；⑶將菇片縱向撕開，在每個裂面靠近菇片邊緣處取一米粒大小的菇肉組織接于馬鈴薯麩皮培養基上。每張菇片共撕10個裂面，接10支試管，一次分離共接30-40支試管；⑷將試管置于15-30℃下培養；⑸培養期間每天都要檢查發菌情況，從中選擇菌絲濃白粗壯、邊緣整齊、長速正常、無綠、黃及漿糊狀等雜菌斑點的，表現最好的分離種轉接于木屑麩皮培養基上，于15-30℃下培養；⑹菌絲發滿后，在接種箱內去掉棉塞，用蠟封口，用黑膜包裹后于4-9℃的冰箱內保藏；⑺在下一個生產季節與原始保藏種作對比試驗，擇優作為生產用種。每季都如此復壯，能逐步提高菌種各方面的性狀，使發菌加快，抗逆抗雜性增強，質量明顯提高。
