隨著東北地區(qū)香菇栽培面積的不斷擴(kuò)大，香菇品種也在逐年更新。組織分離方法是一種香菇無性繁殖方法，這種分離母種方法，操作簡便，其繁殖的后代變異小，能保持原菌株的優(yōu)良特性，因此大多數(shù)科研院校及制種單位，在品種審定后，都采用這種方法來保持菌株的優(yōu)良種性，并用其原始母種擴(kuò)繁原種及栽培種，并應(yīng)用于生產(chǎn)。一般3～4年后，菌株才開始逐漸表現(xiàn)出衰老退化現(xiàn)象。
1.分離用種菇的選擇 在優(yōu)良品種出菇選擇單菇重量大、菌蓋圓整、菌柄細(xì)短、菌肉厚實(shí)、顏色鮮、有鱗片且無病蟲害的單菇，要求開傘度在7～8分正處在正常生長中的種菇。
2.種菇的消毒處理 選好的種菇帶入接種室內(nèi)，剪去菇根，用消毒鑷子夾住菌柄，并用1%的升汞水或用75%的醫(yī)用酒精擦拭消毒2～3遍，然后將分離用工具用常規(guī)法消毒后移入無菌分離區(qū)。
3.分離種菇的組織塊 在無菌條件下，用酒精擦手消毒后，用手縱向?qū)⒎N菇掰開，迅速用接種刀將掰開菇的菌蓋和菌柄的交界處菌肉上橫劃兩刀，并在劃口中間每隔2毫米豎劃一刀，及時(shí)用鑷子夾取組織塊，迅速接入試管斜面培養(yǎng)基中間部位，并用鑷子稍壓一下，以保證組織塊與培養(yǎng)基充分接觸。
4.母種的培養(yǎng)接種后將試管放在溫度23～25℃的培養(yǎng)箱中，經(jīng)2～3天，可見組織塊周圍有灰白色放射狀的菌絲，再過1～2天菌絲開始蔓延到試管斜面上。大約12～15天菌絲可長滿整個(gè)試管，選擇菌絲潔白粗壯、整齊一致平鋪于斜面上的試管留作母種，其余淘汰。母種經(jīng)低溫復(fù)壯后就可以擴(kuò)繁原種、栽培種及進(jìn)行出菇試驗(yàn)。
1.分離用種菇的選擇 在優(yōu)良品種出菇選擇單菇重量大、菌蓋圓整、菌柄細(xì)短、菌肉厚實(shí)、顏色鮮、有鱗片且無病蟲害的單菇，要求開傘度在7～8分正處在正常生長中的種菇。
2.種菇的消毒處理 選好的種菇帶入接種室內(nèi)，剪去菇根，用消毒鑷子夾住菌柄，并用1%的升汞水或用75%的醫(yī)用酒精擦拭消毒2～3遍，然后將分離用工具用常規(guī)法消毒后移入無菌分離區(qū)。
3.分離種菇的組織塊 在無菌條件下，用酒精擦手消毒后，用手縱向?qū)⒎N菇掰開，迅速用接種刀將掰開菇的菌蓋和菌柄的交界處菌肉上橫劃兩刀，并在劃口中間每隔2毫米豎劃一刀，及時(shí)用鑷子夾取組織塊，迅速接入試管斜面培養(yǎng)基中間部位，并用鑷子稍壓一下，以保證組織塊與培養(yǎng)基充分接觸。
4.母種的培養(yǎng)接種后將試管放在溫度23～25℃的培養(yǎng)箱中，經(jīng)2～3天，可見組織塊周圍有灰白色放射狀的菌絲，再過1～2天菌絲開始蔓延到試管斜面上。大約12～15天菌絲可長滿整個(gè)試管，選擇菌絲潔白粗壯、整齊一致平鋪于斜面上的試管留作母種，其余淘汰。母種經(jīng)低溫復(fù)壯后就可以擴(kuò)繁原種、栽培種及進(jìn)行出菇試驗(yàn)。
